操作步驟: - 將各試劑移至室溫平衡半小時,取濃縮洗液,根據當批檢測數量,用蒸餾水1:10稀釋,混勻後備用。
- 將預包被板從袋中取出,設一個空白對照孔,不加任何液體;每個標準點依次各設兩孔,每孔加入相應標準品50ul;其餘每個檢測孔直接加待測血清50ul。
- 每孔加入酶結合物50ul(空白孔除外),充分混勻,貼上不乾膠封片,置37℃溫育1小時。
- 手工洗板:棄去孔內液體,洗液註滿各孔,靜置10秒甩乾,重復3次後拍乾。洗板機洗板:選擇3次洗板程序洗板後拍乾。
- 每孔加顯色液A、B各一滴或50ul,振蕩混勻後,室溫避光顯色
15分鐘,每孔加終止液一滴或50ul。 - 用酶標機讀數,取波長450nm(建議使用雙波長的酶標機比色,參
考波長630nm),先用空白孔調零點,然後測定各孔OD值。 數據處理: - 用普通座標紙,以標準品濃度為橫軸,以對應的OD
值為縱軸,畫出平滑曲線或直線,在曲線上按照待測血清OD值查 出待測血清濃度。 技術指標: - 批內變異< 8%,批間變異< 10%;
- 本實驗室測定正常人空腹血為uIU/ml,餐後1小時為35~210uIU/ml,餐後/空腹比值為> 3倍.餐後3小時下降至接近空腹。受各種因素影響,各實驗室應建立自己的正常值.
質控血清參考值: L-I = 25.0(18.0 ~ 32.0 ) L-II = 60.0(48.0 ~ 72.0) 使用時註意事項: - 從冷藏環境中取出的試劑盒所有組份應置室溫平衡30分鐘後使用,
餘者應及時封好口,放回2-80C避光保存,以備後用。 - 使用前試劑應搖勻,滴瓶應棄去1~2滴後垂直滴加。
- 封片不能重復使用。
- 結果判斷須在反應終止後10分鐘內進行。
- 不同批號試劑不可混用。
- 加樣時註意避免所試劑及樣品之間的交叉污染。
- 操作時,試劑盒內每種試劑各使用一個吸頭,每個樣品各使用一個吸頭,吸頭最好一次性使用。如反復使用必須經過處理。處理方法如下:
先用酸浸泡24小時,再用堿浸泡24小時,依次用自來水、蒸餾水沖洗乾凈,高溫高壓滅活,烘乾後方可再利用。 |