操作步驟

1. 將所需用量的微孔條放置在支架上；
2. 在分別註明標號的反應微孔中依次加入50μl標準品，質控血清，待測標本（用微量加樣器加樣）；
3. 每孔加入50μl酶結合物，輕輕振蕩微孔支架，充分混勻；
4. 在37℃水浴箱或溫箱中溫育60分鐘；
5. 將各孔液體棄盡，用洗液（或蒸餾水±）沖洗五次，每次沖洗應將水分棄盡，最後一次沖洗後將微孔支架倒置在吸水紙上吸盡殘餘水分，切勿擦拭反應微孔內壁；
6. 每孔加1滴（50μl）顯色液A，再加1滴（50μl）顯色液B，充分混勻，在室溫（20-28℃）下避光反應15分鐘；
7. 顯色反應15分鐘後，每孔加1滴（50μl）終止液，並混勻；
8. 以顯色液A、B、終止液（各1滴）的混合液體作空白孔，用微孔型酶標機在450nm波長下依次以空白、標準品，標本的順序讀記吸光度；
9. 應在加終止液後的30分鐘內讀取吸光度。
10. 結果計算質控及病人標本的B/B₀%。
    B=標準品、標本OD值
    B₀=標準品“0”點OD值
11. 以標準品濃度（ng/ml）為橫座標，B/B₀%為縱座標，在對數座標紙上繪制標準曲線。
12. 在標準曲線上查出待測標本濃度。
13. 每次實驗均需帶標準品，計算結果是按本次實驗的標準曲線反算。

正常值范圍

每個實驗室都應根據本實驗室條件及接觸的人群作出自己實驗室孕酮正常值范圍。下列正常值范圍為本公司提供的參考值：

男性：< 0.6ng/ml

女性：卵泡期   0.3-1.7 ng/ml             

絕經期   ＜1.7ng/ml
              黃體期    3.0-32 ng/ml            

妊娠期  ＞250 ng/ml

技術指標：

靈敏度：0.2ng/ml

註意事項：

1. 實驗室水箱溫度：37⁰C，實驗前必須檢查。
2. 試劑從冰箱取出後，放室溫平衡15分鐘，實驗過程中室溫18⁰C — 25⁰C。
3. 定期檢驗移液器是否準確。
4. 嚴格按說明書操作，不同批號試劑不得混用，不要混淆試劑瓶蓋。
5. 每次實驗必須帶1 — 2個質控血清，加樣後輕搖微孔條，一定要充分混勻，實

    驗結果必須是質控血清在質控范圍內，方可發報告。

1. 註意洗板時間，每次洗後需拍乾後再洗杜絕連續沖洗；無洗板機時，最好用振蕩

   器洗板，確保質量，若沖洗不凈會影響結果。

1. 酶標機測定前需提前預熱，經調“0”重復結果後再測定樣品，最好每次測一空

   板，避免機器內有液體未被發現時影響結果。

1. 六項指標相互關聯，遇異常情況及時與臨床聯系，查詢病員是否服藥等特殊情況。
2. 試劑使用後應及時放回冰箱。
3. 顯色B貯存時，應避免光線直接照射。
4. 未用完的微孔板放在封口袋內保存。

質控參考值

L-I  2.5(1.9～3.1) ng/ml

L-II 10.0(7.5～ 12.5)ng/ml

新手教學

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