【預期用途】

用於對需氧和兼性厭氧革蘭陽性球菌、一些需要復雜營養的需氧革蘭陽性球菌和單核細胞增多性李斯特桿菌進行鑒定。

【檢驗原理】

1. 1. 吡咯烷酮試驗（PYR）：利用細菌具有特異性的吡咯烷酮酶，作用於吡咯烷酮發生生物、生化反應，使其水解，產物顯色；
2. 2. 馬尿酸鹽試驗：利用細菌具有特異性的馬尿酸水解酶，作用於馬尿酸鹽發生生化反應，使其水解，再滴加茚三酮試劑使其顯色；
3. 3. 膽汁溶菌試驗：膽鹽溶液促進肺炎鏈球菌的自溶酶對細菌自身的溶解；
4. 4. 血漿凝固酶試驗：利用細菌所產血漿凝固酶使血漿凝固成腖狀；
5. 5. β-內酰胺酶試驗：利用細菌所產β-內酰胺酶，作用於顯色β-內酰胺類藥物，使其水解，產物顯色；
6. 6. 觸酶試驗：利用細菌所產過氧化物酶，作用於過氧化氫而產生氧氣而出現大量氣泡；
7. 7. 芽管試驗：白色假絲酵母的芽生孢子在小牛血清中開始產生菌絲體的速度比其他大多數酵母菌種更快。與其他一些酵母菌種不同，白色假絲酵母早期芽管的菌絲或假菌絲具有一種管狀結構，孢子與芽管連接處無“紮緊痕跡”；而熱帶假絲酵母的孢子比白色假絲酵母大，孢子與芽管連接處有“紮緊痕跡”；
8. 8. 膽汁七葉苷試驗（B-E）：利用腸球菌耐受膽汁不被抑製，在膽汁培養基中水解七葉苷為七葉苷原和葡萄糖。七葉苷原與鐵鹽反應形成棕黑色或黑色化合物。枸櫞酸鐵作為指示劑指示七葉苷的水解和七葉苷原的形成。膽鹽用於抑製腸球菌以外的其它革蘭陽性球菌。

【儲存條件及有效期】

1. 1. 儲存條件：避光，乾燥，2℃~8℃；
2. 2. 有效期限

1) 吡咯烷酮試驗試劑（PYR）,有效期限為16個月;

2) 馬尿酸鹽試驗試劑, 有效期限為9個月；

3) 膽汁溶菌試驗試劑，有效期限為13個月；

4) 血漿凝固酶試驗試劑，有效期限為8個月；

5) β-內酰胺酶試驗試劑，有效期限為12個月；

6) 觸酶試驗試劑，有效期限為20個月；

7) 芽管試驗試劑，有效期限為10個月；

8) 膽汁七葉苷試劑（B-E），有效期限為10個月。

【樣本要求】

純菌落，革蘭陽性菌，應符合目標菌的菌落特征、鏡下特征及其它生化特征。

【檢驗方法】：先對目標菌進行初步篩選，主要是通過“菌落特征”和“鏡下特征”進行篩選，若符合則可用快速鑒定試劑做快速鑒定。 各個具體方法如下（並參考附件中的鑒定流程圖）：

一、 吡咯烷酮試驗（PYR）檢驗方法

1. 1. 用PYR緩沖液A液浸潤PYR測試條末端濾紙；
2. 2. 用接種環從適合的瓊脂培養基上挑取可疑的單個典型菌落，在末端濾紙上塗抹開；
3. 3. 放置於密閉容器（如蓋上的空平皿，防止水分丟失），35±2℃，5~10min孵育；
4. 4. 滴加一滴PYR緩沖液“B液”至末端塗抹細菌處，觀察是否有紅色產生。

二、 馬尿酸鹽試驗檢驗方法

1. 1. 取一支馬尿酸鹽試管；
2. 2. 用人造絲拭子（勿用醫用棉簽）或小木棍或接種環刮/挑取若乾可疑的單個典型菌落至馬尿酸鈉溶液小試管中（不要挑取到瓊脂，因為蛋白質的存在可引起一種弱陽性反應），洗脫，使其乳化，形成較濃菌懸液，擰緊；
3. 3. 35±2℃，1.5~2h孵育；
4. 4. 擰開試管帽，滴加約0.2mL（滴瓶約4滴）茚三酮溶液並輕輕搖動使其混勻，擰上試管帽；
5. 5. 35±2℃，5~10min孵育；觀察是否有深紫藍色產生（孵育時間不超過30min，否則可產生假陽性結果）。

三、 膽汁溶菌試驗檢驗方法

1. 1. 取一膽鹽溶液小試管
2. 2. 擰開試管帽/塞，用人造絲拭子（勿用醫用棉簽）或接種環刮/挑取若乾可疑的單個典型菌落於膽鹽溶液小試管中，洗脫，使其乳化，形成較濃的菌懸液（約1~2#麥氏標準濁度的濃度），擰緊；另取一支生理鹽水小試管（裝量與膽鹽溶液相同），相同手法調成同樣濁度的菌懸液，擰緊，作為陰性對照；必要時可取已知肺炎鏈球菌做陽性對照；
3. 3. 35±2℃，15~20min孵育；與陰性對照管比較，觀察小試管內菌懸液濁度是否明顯降低。

四、 血漿凝固酶試驗檢驗方法

1. 1. 取一支乾粉兔血漿小試管，加入約0.5mL生理鹽水使其復溶
2. 2. 用人造絲拭子（勿用醫用棉簽）或接種環刮/挑取若乾可疑的單個典型菌落於試管中，洗脫，使其乳化，形成較濃菌懸液，擰上試管帽；
3. 3. 35±2℃，1h~4h孵育後觀察，觀察時切勿振搖或顛倒試管，凝固為陽性，若陰性，繼續觀察至24h，不凝固為陰性；試驗應同時做陽性、陰性對照。

註：試驗時間長短與接種菌量成反比。

五、 β-內酰胺酶試驗檢驗方法

1. 1. 用冷凝水或乾凈水浸潤β-內酰胺酶測試條末端濾紙；
2. 2. 用接種環或小木/竹簽挑取可疑的單個典型菌落，在末端濾紙上塗抹開，35±2℃孵育後觀察有無紅色產生，結果解釋詳見表2。

六、 觸酶試驗檢驗方法

1. 1. 用小木棒或竹簽挑取可疑的單個典型菌落（避免挑到瓊脂，以免血液中的過氧化物酶產生假陽性反應），將木棒或竹簽投入到含試劑的小試管中（手柄在上）；
2. 2. 觀察是否立即劇烈產生大量氣泡。

七、 芽管試驗檢驗方法

1. 1. 取一支芽管試劑 
2. 2. 用接種環挑取適量可疑的單個典型菌落，接種，使其乳化
3. 3. 35±2℃下孵育1h-3h，不超過3h，期間間隔一段時間可取菌懸液觀察結果；
4. 4. 取菌懸液至載玻片，在高倍鏡（400×）下觀察芽管及其結構特性。

八、 膽汁七葉苷試驗（B-E）檢驗方法

1. 1. 取1膽汁七葉苷小試管
2. 2. 擰開試管帽/塞，用人造絲拭子（勿用醫用棉簽）或接種環刮/挑取可疑待測菌落至膽汁七葉苷小試管中，洗脫，使其乳化成較濃的菌懸液
3. 3. 35±2℃，1~2h孵育；觀察是否有棕黑色或黑色產生。

【陽性判斷值或者參考區間】

【檢驗結果的解釋】

1. 1.                        表1.結果解釋

1. 2. 芽管試驗：3h內芽管試驗陽性且孢子與芽管連接處無“紮緊痕跡”，則為白色假絲酵母；孢子與芽管連接處有“紮緊痕跡”的為熱帶假絲酵母，無芽管的則為其它酵母菌。
2. 3. β-內酰胺酶試驗：對大多數細菌而言陽性反應通常在5min內，但是，對於某些葡萄球菌陽性反應可長達1h。

表2 β-內酰胺酶試驗結果解釋

*敏感性應該通過藥敏試驗予以確認。陰性結果預示但不保證敏感。

【檢驗方法的局限性】

單獨用試劑鑒定微生物不能作出準確的鑒定結果，須結合菌落特征、鏡下特征、其它生化特征，或與其它試劑結合使用，才能做出準確鑒定。

【產品性能指標】

表3性能指標

【聯系方式】

聯系人：餘經理

聯系電話：18584605291

QQ：779060594

郵箱：[email protected]

1）醫院臨床微生物學的檢驗，包括臨床標本的接種、分離培養，鑒定，藥敏試驗和其它特殊試驗等；

2）衛生防疫及公共衛生監測；

3）各大藥廠、食品廠、醫院等潔凈環境的監測。

產品和服務涉及：

1、標本采集、處理、接種、染色；

2、菌株的分離純化；

3、細菌及酵母的簡捷鑒定；

4、細菌及酵母的藥敏試驗；

5、血培養（系統）；

6、菌種的保存；

7、耐藥統計分析的應用支持（如WHONET軟件的應用）；

8、CLSI標準（中/英文）交流；

9、特殊試驗及科研定製配套的個性服務。

本公司主要產品有雙相血培養系統、血瓊脂平板、哥倫比亞血瓊脂平板、無抑製劑巧克力瓊脂平板、HIN巧克力瓊脂平板、TM巧克力瓊脂平板、營養瓊脂平板、沙門、志賀菌屬瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板、Amies采樣運送拭子、真菌藥敏試驗瓊脂平板（MHGMB）等各類成品培養基及微生物檢測試劑和藥敏紙片等。

本公司歡迎新老客戶及各地經銷商前來洽談業務，合作代理。讓我們攜手奮進，共創輝煌！

• 1、廠傢貨源

  廠傢直銷，自產自銷

• 2、產品規格

   5個/包（Ø55 mm、Ø70 mm、Ø90 mm）、10個/包（Ø55 mm、Ø70 mm、Ø90 mm）

• 3、聯系方式

   【聯系人】：餘經理

• 【聯系電話】：18584605291

• 【咨詢QQ】：779060594

• 4、關於售後

  1.如遇任何產品質量問題，經查證是我方原因，無條件退換貨。 

• 2.如遇任何技術方麵問題，本公司將提供全麵及專業的技術支持服務。

• 5、關於發貨

  普通貨物──款到發貨

• 特殊訂單──根據生產安排而定