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產品簡介
DY-7000動物疫病血凝分析機是國內首創,根據國標中重大疫病免疫監測方法研製的高新設備,配套使用達元自動血凝分析管理軟件,能自動監測常見重大動物疫病的免疫抗體效價,及時掌握動物疫病流行規律和疫情動態,建立動物免疫效果監測記錄檔案。
應用領域
DY-7000動物疫病血凝分析機廣泛適用於動物疫病預防控製中心、動物防疫監督所、獸醫藥品監察所、獸醫研究所、大學、疫苗生產和大中型飼養企業等單位。
功能特點
DY-7000動物疫病血凝分析機是國內首創,根據國標中重大疫病免疫監測方法研製的高新設備,配套使用達元自動血凝分析管理軟件,能自動監測常見重大動物疫病的免疫抗體效價,及時掌握動物疫病流行規律和疫情動態,建立動物免疫效果監測記錄檔案。系統當前監測項目有:豬瘟抗體正向間接血凝檢測、口蹄疫抗體正向間接血凝檢測、高致病性禽流感H5亞型抗體血凝抑製檢測、高致病性禽流感H7亞型抗體血凝抑製檢測、高致病性禽流感H9亞型抗體血凝抑製檢測、新城疫抗體血凝抑製檢測。
技術參數
試驗方法:
1 血凝(HA)試驗
1) 在V型微量反應板的1~12孔均孔加入0.025ml PBS,換滴頭。
2) 吸取0.025ml血凝抗原加入第一孔,混勻。
3) 從第1孔吸取0.025ml血凝抗原加入第2孔,混勻後吸取0.025ml加入第3孔,如此進行對倍稀釋至第11孔,從第11孔吸取0.025ml棄去,換滴頭。
4) 每孔再加0.025ml PBS。
5) 每孔均加入0.025ml 1%(V/V)雞紅細胞懸液(將雞紅細胞懸液充分搖勻後加入)。
6) 將反應板在振蕩器上震蕩1~2分鐘或輕扣反應板混合反應物,在室溫(20~25℃)下靜置40分鐘後觀察結果,(如果環境溫度太高,可置4℃環境下),在對照孔紅細胞顯著呈鈕扣狀時判定結果。
7) 結果判定 將板傾斜,觀察紅細胞有無呈淚滴狀流淌。完全血凝(不流淌)的抗原或病毒最高稀釋倍數代表一個血凝單位(HAU)。
2 血凝抑製(HI)試驗
1) 根據HA試驗測定的效價,計算配製4個血凝單位(4HAU)抗原。以完全血凝的病毒最高稀釋倍數作為終點,終點稀釋倍數除以4即為含4HAU抗原的稀釋倍數。例如,HA效價為1:256,則4HAU抗原的稀釋倍數應是1:64(256除以4)。
2) 加稀釋液:
在微量反應板的第1~11孔加入0.025ml PBS,第12孔加入0.05ml PBS。
3) 稀釋待檢血清:
取1號待檢血清0.025ml加入第一排第1孔,充分混勻後吸0.025ml於第2孔,依次對倍稀釋至第10孔,從第10孔吸取0.025ml棄去。
取2號待檢血清加入第2排;取3號待檢血清加入第3排……均按上法稀釋。
註意!每取一份血清時,必須更換吸頭。
4) 稀釋陰性血清:
在血凝板的第7排第一孔加陰性血清0.025ml,對倍稀釋至第3孔,混勻後從該孔取出0.025ml棄去。
5) 稀釋陽性血清:
在血凝板的第8排第1孔加陽性血清0.025ml,對倍稀釋至第10孔,混勻後從該孔取出0.025ml棄去。
6) 第1~11孔均加入含4HAU混勻的病毒抗原液0.025ml,在室溫(20~25℃)下靜置30分鐘或2~8℃ 50分鐘。
7) 每孔加入0.025ml 1%(V/V)的雞紅細胞懸液,震蕩混勻,在室溫(20~25℃)下靜置20~30分鐘或2~8℃;45~60分鐘,對照紅細胞將呈明顯鈕扣狀沉於孔底。
結果判定
以完全抑製4 HAU抗原的最高血清稀釋倍數判為該血清的HI效價。
隻有陰性對照孔血清滴度不大於2log2,陽性對照血清誤差不超過1個滴度,試驗結果才有效。
禽流感滅活疫苗的免疫效果判定:傢禽免疫後21天進行免疫效果監測。禽流感抗體血凝抑製(HI)抗體效價≥24判定為合格
存欄傢禽抗體合格率達到≥70%判定為合格。
新城疫免疫效果監測:免疫21天後,進行免疫效果監測。抗體血凝抑製試驗抗體效價≥25判定為合格
存欄傢禽抗體合格率達到≥70%判定為合格。
註意事項
(1)HA和HI試驗影響因素甚多,應嚴格控製試驗條件。每加一試劑或樣品後需更換吸頭,同時應嚴格控製作用溫度和時間。
(2)準確配製紅細胞懸液,使用時應隨時振搖。
(3)用pH值7.0~7.2的PBS作為稀釋液。
(4)抗原和陰、陽性血清若有污染,應廢棄。
(5)準確配製4HAU抗原,使用前需進行滴定,滴定好的抗原應在2小時內用完。
(6)抗原和血清按規定保存。凍乾試劑應按規定的體積用PBS溶解。溶解後2~8℃保存不超過1個月;可分裝成小包裝,-70℃凍存,隨用隨取。切忌反復凍融。
(7)鴨、鵝以及哺乳動物的血清一般需進行非特異性凝集和抑製素的處理。
(8)同一亞型不同毒株的HI試驗抗原,若抗原性存在差異,則檢測同一血清的HI效價不同。
(9)在使用微量加樣器時,槍頭進入試劑瓶麵下約2~3ml深處,不可過深。待槍頭撤出液麵後斜貼在試劑瓶的瓶壁上,淌走多餘的液體,防止形成液滴滴入凝集板孔中。
(10)雞紅細胞懸液最好是現配現用,剩餘的放於4℃保存,如果出現溶血現象則不能使用。
(11)每次檢測可隻做一份陰陽性血清對照試驗。
(12)試驗完成後最好立即上機判讀,否則易出現紅細胞下滑現象。
(13)凍乾對照血清和抗原存放於-20℃,溶解過後存放於4℃。
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