NanoPro 1000信號轉導蛋白磷酸化分析系統
在細胞生物學功能研究中,有許多常規的研究手段,如流式,生物質譜,雙向電泳,蛋白芯片等技術。隨著研究的深入,科學傢們特別需求進行真正意義上的高靈敏,高精度研究手段,力求通過一次實驗,快速發現更多的信息:鑒定結果更為可信,靈敏度更加提高來鑒定更多低豐度蛋白,更多的修飾信息,結構信息等。傳統分析技術具有很多局限性,如雙向凝膠電泳(2DE),對疏水性蛋白、堿性蛋白、特別是低豐度蛋白等無能為力,成為蛋白質組研究的瓶頸; 而質譜分析技術也是由於靈敏度等問題,需要大量的樣品等原因,十幾年來一直對研究低豐度調控蛋白缺乏信心.
傳統蛋白分析技術所用的蛋白量需來自成千上萬個細胞。所得結果分辨率及重復性不理想。各種蛋白分析法所需樣品量如下:
質譜機樣品量 100000 個細胞
細胞機 樣品量:10000 個細胞
蛋白電泳,樣品量:5000 個細胞
蛋白芯片 樣品量:1000個細胞
ProteinSimple公司的NanoPro 1000超微量蛋白分析系統為蛋白功能和信號通路研究提供瞭一個全新的研究方案。傳統的蛋白研究方法需要成千上萬的細胞,而NanoPro 1000系統每次分析僅需要25個細胞。
並可對超微量珍貴樣品的信號轉導蛋白之特性直接檢測,適用各種樣品包括:
原代細胞
FACS 分選細胞
穿刺抽取之腫瘤細胞
顯微切片組織細胞
分離的乾細胞群
NanoPro系統利用專利的毛細管樣品定位及分析技術,結合毛細管分離及化學發光檢測原理進行納米級的自動化實驗,避免瞭人為操作誤差,有效提高檢測結果的精確性和重復性。過去蛋白檢測機無法檢測到的信息,如細胞內控製通路的調控信息,可由此精確測得。
NanoPro技術被用來分析信號轉導過程中所涉及的蛋白構象上的極細微變化。
NanoPro1000從新的角度分析蛋白調控機製,NanoPro技術采用等電點電泳的方法將不同構象的蛋白分離。該方法大大推進瞭多個領域的研究,包括:
藥物開發-篩選激酶抑製劑藥物的作用靶點
生物標記物的發現和確認-觀察疾病引起的蛋白構象的細微變化,研究其發病機製
腫瘤蛋白活性-研究組織和細胞中腫瘤蛋白的調控機製翻譯後修飾的研究-檢測蛋白構象改變引起的等電點極細微的變化
NanoPro 1000將蛋白分離與檢測技術相結合:
NanoPro將毛細管等電點電泳和化學發光免疫測定這兩種常用的蛋白檢測技術相結合。等電點電泳可將不同構象的蛋白分離。分離後蛋白被機器固定在毛細管壁上,接著用化學發光免疫的方法檢測蛋白。這為信號轉導蛋白的檢測提供瞭新的視角。
【操作流程】
上樣
每個毛細管中加400nl樣本混合物,包括樣本、熒光標記PI和兩性電解質。
分離
毛細管兩端加電壓,樣本中的蛋白質隨著自身等電點的不同,加以分離。
固定
毛細管在紫外光照射下,其毛細管壁上的專利化學物質被激活,從而將分離的蛋白異構體固定在毛細管壁上。
免疫標記
用洗脫液將非特異結合的蛋白質洗脫,將固定的蛋白質進行免疫反應,加入發光催化劑誘導其化學發光,發光信號被CCD攝影機拍攝下來。
結果分析
通過專業的軟件,對結果進行定量分析。
山東愛博為美國ProteinSimple在山東省內的唯一代理商。
關於美國ProteinSimple公司 (簡稱 PS公司) PS公司總部位於美國矽谷,是世界一流的生命科學機器製造商,專註於蛋白質研究分析領域,在美國加州、加拿大多倫多、加拿大渥太華等地設有生產和研發部門,同時在全球多地設有辦事處。PS公司重視中國市場的發展,在北京、上海,廣州和武漢設有辦事處和技術服務中心,為用戶提供完善的技術支持和售後服務。 PS公司生產的機器主要有 Wes全自動蛋白質印跡定量分析系統、 NanoPro 1000超微量蛋白分析機、 iCE280毛細管等點聚集分析機、 MFI流式顆粒分析機、 dPC數字化蛋白質組芯片分餾機、 Alpha凝膠成像系統、 Alpha化學發光和多色熒光成像系統等等。 大傢熟悉的原Alpha Innotech公司創立於1982年,總部位於美國加州,2005年上市,2009年底被PS公司收購。 Alpha Innotech在數字化凝膠成像領域有20年的成功歷史,用戶超過20000個,引用的文獻近10000篇。在凝膠成像領域處於領先地位,是高端多色熒光和化學發光技術的全球領導者。 作為居世界領先地位的專業公司之一, PS致力於發展先進的蛋白質分析技術。為蛋白質信號,蛋白質聚集,基於蛋白質純度,蛋白質成像,以及蛋白質分離等研究建立瞭一整套獨特的分析工具。我們深信,PS的高品質產品及與之相關的技術,必將給您的工作帶來巨大的幫助。
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