喹乙醇酶聯免疫檢測試劑盒說明書
簡介：
喹乙醇又稱喹酰胺醇，商品名為倍育諾、快育靈，是一種抗菌促進生長劑，具有促進蛋白同化作用，提高飼料轉化率，使傢畜增重加快。對革蘭氏陰性菌有抑製作用；對革蘭氏陽性菌有一定的抑製作用。由於喹乙醇有中度至明顯的蓄積毒性，對大多數動物有明顯的致畸作用，對人也有潛在的三致性，即致畸形，致突變，致癌。因此喹乙醇在美國和歐盟都被禁止用作飼料添加劑。《中國獸藥典》(2005版)也有明確規定，喹乙醇被禁止用於傢禽及水產養殖。
本試劑盒是應用ELISA技術研發的藥物殘留檢測產品,與機器分析技術比較，能經濟、快速地檢測出魚、蝦、禽、肝臟、飼料等組織中的喹乙醇殘留量。
- 1. 檢測原理：
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測等樣本中的喹乙醇，在微孔條上預包被上偶聯抗原，利用抗原與抗體的特異性免疫化學反應的原理來進行的，樣本中的喹乙醇和微孔條上預包被偶聯抗原競爭抗喹乙醇抗體，加入酶標記物後，用TMB底物顯色，樣品中的喹乙醇含量與樣品的吸光度值呈反比，與標準曲線比較即可得出喹乙醇含量。
- 2. 操作時間：75分鐘 (30分+30分+15分鐘顯色)
- 3. 檢測下限：0.2ppb
- 4. 回收率：
組織： 80±10%
飼料： 80±10%
- 5. 交叉反應率：
喹乙醇---------------------------------100%
卡巴多---------------------------------﹤7%
- 6. 試劑盒的組成：
1) 96孔酶標板：12條*8孔（包被有喹乙醇偶聯抗原）.
2) 喹乙醇標準液6瓶：1ml /瓶， :
0ppb, 0.2ppb， 0.6 ppb， 1.8 ppb， 5.4 ppb， 16.2 ppb
3) 喹乙醇抗體工作液： 7ml
4) 酶標記二抗： 12ml
5) 顯色液A： 7ml
6) 顯色液B： 7ml
7) 終止液： 7ml
8) 濃縮洗滌液（需20倍稀釋）： 25ml
9) 濃縮復溶液（需10倍稀釋）： 25ml
- 7. 溶液的準備：
用蒸餾水20倍稀釋濃縮洗滌液。
用蒸餾水10被稀釋濃縮復溶液。
- 8. 樣品前處理：
（a）組織（豬肝、豬肉、魚、蝦等）樣本的處理方法
1.稱2±0.05g組織，加入10ml無水乙腈，振蕩 5min,室溫4000r/min以上離心10min。
2.取上清液5ml於50℃氮氣或空氣下吹乾。用
2ml正己烷溶解乾燥物，加入1ml提取液充分
混合30s；4000r/min以上離心5min。
3.此時上層為正己烷，下層為樣本液。
4.取下層樣本液進行分析
樣本稀釋倍數：1
（b）飼料樣品的處理方法
1.將飼料樣品研碎，稱1.0±0.05g研碎的飼料
樣品，加入2g Al2O3 ，然後加入5ml乙腈，
劇烈震蕩2min，室溫避光靜置8min，取出
上清液50ul與已稀釋好的復溶液950ul（2X
濃縮復溶液與去離子水1:1稀釋），混勻，
25℃，4000r/min,；離心5min。
2. 取上清進液行分析。
樣本稀釋倍數:100
- 9. 酶聯免疫實驗設計：
1） 將所有試劑升至室溫20-25℃，一旦開始實驗，一定要連續不間斷。
2） 所有標準液和待測樣為減少操作誤差，最好同時做平行實驗。
3） 檢測樣品建議做平行實驗（可以減少實驗過程中因操作失誤而影響實驗結果）。
- 10. 操作步驟：
使用前將試劑盒置於室溫（20-30℃）平衡30min以上，註意每種液體試劑使用前均須搖勻。
1） 加50μl的標準品或處理好的樣品到各自的微孔板中， 再加50μl喹乙醇抗體工作液到微孔板中，25±2℃下暗處孵育30分鐘。
2） 棄去孔中的液體，並在吸水紙上拍乾，每孔註滿稀釋好的濃縮稀釋液，輕輕振蕩，放置半分鐘，棄去孔中液體，並在吸水紙上拍乾，重復4次。
3） 加入酶標記二抗100μl每孔，25±2℃下暗處孵育30分鐘，然後洗板（重復步驟2）
4） 顯色液A和顯色液B各加50μl到微孔中，並在25±2℃暗處孵育15分鐘。
5） 加50μl終止液到微孔板中，在450nm處測量吸光度值（建議用雙波長450/630nm檢測），必須在加入終止液後5分鐘內讀取吸光度值。
批發市場僅提供代購諮詢服務，商品內容為廠商自行維護，若有發現不實、不合適或不正確內容，再請告知我們，查實即會請廠商修改或立即下架，謝謝。
