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農藥殘毒快速檢測試劑使用說明書
執行標準:GB/T 5009.199-2003
一、試劑保存
配製前均為冷凍保存,有效期18個月(0-5℃冷藏保存為12個月)。
二、試劑配製
緩沖液:取一包用500ml蒸餾水搖勻溶解後常溫備用。
酶 液:取一瓶加入10ml緩沖液搖勻溶解,用時取100μl,配製後0-5℃冷藏保存。
顯色劑:取一瓶加入10ml緩沖液搖勻溶解,用時取100μl,配製後0-5℃冷藏保存。
底 物:取一瓶加入10ml蒸餾水搖勻溶解,用時取100μl,配製後0-5℃冷藏保存。
三、檢測樣本製備
1、取有代表性的果蔬除去泥土,葉菜取葉片部分,用天平稱取2g,瓜果取皮4g。
2、將菜樣剪成1cm見方大小置於小燒杯內,加入10ml緩沖液,震蕩1~2分鐘。
3、將其過濾(或倒入另一容器內靜置2~5分鐘後取上清液)即為樣本提取液。
四、測試
取適量試管,其中一支加入2.5ml緩沖液來做空白對照,其餘分別加入2.5ml待測樣本液,再分別依次加入:
酶100μl→ 顯色劑 100μl 搖勻,放置10分鐘 (如果混合後溫度低於20度,最好是放置到35-40度的溫水中加溫10分鐘)再加入底物100μl(以2ml配製時則取20μl)
搖勻後馬上倒入比色皿中再放入機器內,做空白對照的比色皿必須放入第一通道,再按 “空白”鍵等待檢測結果。(做過對照後,接下來的檢測則按“樣品”,但重新開機或更換試劑後需要再做一次空白對照)
註:檢測時間為3分鐘的空白對照值△AO應≥0.3;標準檢測應該是37℃培養,所以當溫度低於20℃時應采取加溫措施,以提高數據的準確性;若△AO<0.3,又無條件加溫時,空白及樣品的酶量可加倍。
五、結果判定
抑製率<50%時判定為合格;抑製率≥50%時農藥殘毒超標,必要時可進行定量檢測。
六、提 示
1、試劑配製時,用一瓶配製一瓶,試劑用前應搖勻;
2、試劑從冰箱取出後應在室溫放置5分鐘後再使用,用前搖勻;
3、試劑應避免交叉污染,取出後的試劑不可再打回瓶內,以免造成更大損失;
4、酶配製後經常用但10天內用不完的,建議分裝為兩瓶保存,其中一瓶可避免反復冷熱交替而降低酶的活性。
七、包裝規格:酶、底物、顯色劑各5瓶,緩沖試劑10包。(可根據要求定製包裝規格)
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