於快速製備供免疫分析和電泳分離法使用的組織樣本
參考：R. H. ffrench-Constant/A. L. Devonshire, Biochemical Genetics, Vol. 25, Nos. 7/8, 1987.

本多重均質器（最初設計用於昆蟲樣本）可以同時製備96個組織樣本，將均質化的時間減少瞭10倍。這樣一個人一天最多就可以製備3000個用於免疫分析的樣本。

較早的方法耗時耗力，其使用帶有緊密排列玻璃棒的標準微離心管。當量化形成蚜蟲對殺蟲劑抵抗力的酶的活動時，這些方法限製瞭樣本的製備規模。

圖中展示瞭精確的部件和組裝方法。將緩沖劑和樣本裝入微型培養皿的井內，然後插入復式杵並按圓周手動旋轉。

經過上述過程並小心拔出杵後，丟失的量隻有5 μl，而這與均質量無關。因此，當分別用10 μl和50 μul進行均質化後，可靠恢復的樣本分別為50％和90％。

分析過程所需的其他設備包括：專門的電泳凝膠體梳（與微型培養皿的坑相對應）、8個位置的復吸液管、電泳櫃和供電裝置。

用於快速製備供免疫分析和電泳分離法使用的組織樣本的多重均質器
Alan Devonshire

對諸如昆蟲等小生物體進行的群體遺傳學研究需依靠電泳或免疫分析技術，其要求對眾多個體進行分析方可保證結果的代表性。用於電泳分析的昆蟲樣本通過各種均質器進行均質化，比如帶有緊密排列的玻璃棒的聚丙烯微離心管。但是對單個昆蟲均質化後，利用微量註射器加載凝膠體的工作是整個分析過程中最耗時耗力的部分。當免疫分析發展到要量化形成蚜蟲對殺蟲劑抵抗力的酶的活動時，這種樣本製備方法的局限性就變得更加明顯瞭。

因此我們設計瞭可裝入標準免疫培養皿的多重均質器，其可以同時均質96個單獨樣本以用於免疫分析和電泳分離（ffrench-Constant & Devonshire, Biochemical Genetics, 25, 493－499（1987））。

該均質器由10mm厚的塑料玻璃襯板製成，大小與免疫培養皿類似。在均質器內有96個塑料玻璃棒按9mm的間距排列，與免疫培養皿內的96個井準確對應。棒尖是水平的，與井的水平底部正好一致。

樣本被裝入免疫培養皿井內的緩沖劑中，插入均質器並手動旋轉後將其均質化。4mm直徑的棒較為理想，因為這樣即可以有效均質化又可以在裝配後在井內留下足夠的量（200 μl）。

要想確定均質化過程中“丟失”的數量，可將不同量（10－200μl）的PBS/Tween以及蔗糖和溴甲酚紫放入免疫培養皿的8個井中，在經過插入、旋轉、和拔出均質器的杵後，利用復吸液管確定8個井中可以取回的樣本量。假設均質器是小心拔出的，那麼不管經過均質的樣本量如何，丟失的量均為5μl。這樣當別對10μl和50μl進行均質時，可靠恢復的樣本分別占50％和90％，涵蓋瞭對小生物體使用電泳分離法時的典型數量范圍。

如果要使用8通道復吸液管將樣本直接從免疫培養皿裝入盛有電泳分離凝膠體的井內，則需要使用間隔為4.5或9mm的帶井梳。針對這一目的製作的間隔4.5mm的梳（可從Burkard Scientific購得）可以通過僅使用8通道吸液管的7個尖分兩次來填充不同的井，從而將免疫培養皿的兩行14個樣本裝載到Pharmacia GE-2/4設備（厚3mm，寬72mm）的每個凝膠體上。這樣在一個電泳箱內就可以一次分析56個樣本。盡管吸液管尖過大，不適合Hoffer設備的1.5mm凝膠體井，但也成功地使用該復吸液管將樣本裝入這種設備中（15井的梳，編號：SE 511－15，間隔9.1mm）。

從粉虱（50μg）到傢蠅（20mg）的昆蟲都可以被成功均質化，但僅對蚜蟲（約400μg）進行過功效定量評估，用於通過免疫分析研究形成蚜蟲對殺蟲劑抵抗力的酶。使用多重均質器製備的蚜蟲樣本與與通過微型離心管製備樣本的相比，其得到的酶活動更明顯（P<0.001），差異也更小（P<0.001）。

除瞭更有效的均質化外，樣本製備時間也隻有采用微離心管進行單獨均質化所需時間的1／10。系統其他節省時間的方麵包括：免疫培養皿的井淺並且帶編號，故記錄樣本裝載數據更容易；樣本存儲於堆在冷凍機內的培養皿內；以及使用復吸液管進行液體處理。如有可用於微型培養皿的離心機，則在分析前就可以去掉組織殘片。

隨著免疫分析在調查和診斷研究中作用的提升，該快速樣本製備技術對於與培養皿井內的可用量（10－200μl）一致的組織將會有很多生物和醫學方麵的應用。若選用適當的梳，則該技術也將非常適用於電泳分離研究。假設在梳井間隔方麵沒有其他限製，那麼生產商應考慮采用標準的4.5或9mm間隔，這樣復吸液管就可以在樣本製備和裝載中得到更廣泛的應用。
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