食品中苯並(a)芘在的測定方法有薄層層析法、熒光分光光度法、氣相色譜和液相色譜法,這裡介紹液相色譜法。 ng> 4.1ng>ng>原理
ng>本法主要是利用樣品經過提取、皂化或者液一液分配以及柱層析凈化,除去脂肪類物質、色素和多環芳烴以外的其他物質後,再通過液相色譜機中的色譜柱,將苯並芘從多環芳烴物質中分離出來。求出樣品中苯並芘的含量。 ng>4.2ng>ng>機器ng> (1)液相色譜機: 色譜柱:ODS柱,柱長250mm,Φ4mm; 柱溫:30℃; 流動相:75%甲醇; 流速:2mL/min。 (2)檢測器:熒光檢測器,激發波長369nm,熒光波長405nm。 ng> 4.3 ng>ng>操ng>ng>ng>ng>作ng>ng>ng>ng>步ng>ng>ng>ng>驟ng> (1)定性測定 用微量註射器吸取一定量的苯並芘標準溶液和樣液,註入色譜機內,根據苯並芘的出峰保留時間和樣品中加標準樣產生重疊情況進行定性。 (2)標準曲線的繪制 用微量註射器準確吸取每1mL含1μg的苯並芘標準溶液1、2、3、4、5uL按照上述實驗條件進行操作,以獲得相應的色譜圖。然後,分別測量各個色譜的峰麵積。以峰麵積為縱坐標,標準苯並芘量為橫坐標,繪制標準曲線。 (3)樣品的測定在上述實驗條件下,吸取一定量經過柱凈化的樣品提取液,註入液相色譜機中進行分離、分析,測得峰麵積,然後從標準曲線上查出相應於此麵積的苯並芘含量。 ng> 4.4 ng>ng>結果計算ng> X=A/(M·P) 式中:X—苯並芘含量,μg/g; A—從標準曲線中查出相當於苯並此的標準量,μg; m—樣品的質量,g; P—點樣體積與樣品濃縮體積的比值。 ng>4.5ng>ng>說明及註意事項ng> (1)本法所用試劑及配制方法、樣品的提取、凈化步驟參照熒光分光光第二篇食品理化檢測技術度法。 (2)高效液相色譜分離多環芳烴的效果與洗脫液的比例、柱溫和流速等有關,其最適宜的條件隨機器而異。 (3)本法靈敏度為0.1ng/g。
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