1）將旋光機接於220V交流電源。開啟電源開關，約5分鐘後鈉光燈發光正常，就可開始工作。 　　（2）檢查旋光機零位是否準確，即在旋光機未放試管或放進充滿蒸餾水的試管時，觀察零度時視場亮度是否一致。如不一致，說明有零位誤差，應在測量讀數中減去或加上該偏差值。或放松度盤蓋背面四隻螺釘，微微轉動度盤蓋校正之（隻能校正0.5°左右的誤差，嚴重的應送制造廠檢修）。 　　（3）選取長度適宜的試管，註滿待測試液，裝上橡皮圈，旋上螺帽，直至不漏水為止。螺帽不宜旋得太緊，否則護片玻璃會引起應力，影響讀數正確性。然後將試管兩頭殘餘溶液揩幹，以免影響觀察清晰度及測定精度。 　　（4）測定旋光讀數：轉動度盤、檢偏鏡、在視場中覓得亮度一致的位置，再從度盤上讀數。讀數是正的為右旋物質，讀數是負的為左旋物質。 　　（5）采用雙遊標讀數法可按下列公式求得結果： 　　

  圖五

 

　　式中：A和B分別為兩^[1]遊標窗讀數值。如果A=B，而且度盤轉到任意位置都符合等式，則說明旋光機沒有偏心差（一般出廠前旋光機均作過校正），可以不用對項讀數法。 　　（6）旋光度和溫度也有關系。對大多數物質，用λ=5893A°（鈉光）測定，當溫度升高1℃時，旋光度約減少0.3%。對於要求較高的測定工作，最好能在20℃±2℃的條件下進行

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